Les anticorps primaires anti-bovin conjugués à des fluorophores Atto associent des fluorochromes synthétiques à une reconnaissance antigénique spécifique des protéines bovines, permettant une détection sensible par fluorescence dans les domaines de la recherche vétérinaire et translationnelle. Ces réactifs sont adaptés à l’imagerie multicolore et à la cytométrie en flux, avec une luminosité élevée, une grande stabilité et une reproductibilité accrue dans des échantillons biologiques complexes.
Propriétés des fluorophores
Les colorants Atto couvrent une large gamme spectrale allant du vert au proche infrarouge. Ils présentent un rendement quantique élevé, un faible chevauchement spectral et une forte résistance au photoblanchiment, garantissant une acquisition de signal stable. Les variantes courantes couvrent des longueurs d’onde d’excitation de 480 à 750 nm et d’émission de 510 à 780 nm, permettant des stratégies de multiplexage flexibles.
Principes de conjugaison
Les fluorophores sont liés de manière covalente aux résidus lysine ou cystéine des anticorps via des chimies de type ester NHS ou maleimide. Le contrôle du ratio de marquage permet de préserver l’affinité de liaison à l’antigène tout en optimisant l’intensité de fluorescence. Les étapes de purification éliminent les fluorophores non conjugués, garantissant une stœchiométrie homogène et des performances reproductibles.
Applications de détection
- Cytométrie en flux : profilage multiparamétrique des sous-populations de cellules immunitaires bovines à l’aide de panels multicolores.
- Microscopie à super-résolution : imagerie compatible STED permettant une résolution nanométrique de 30 à 50 nm.
- Immunofluorescence : localisation spatiale des antigènes dans des tissus bovins fixés.
- Microscopie de corrélation de fluorescence : analyse quantitative des cinétiques de liaison moléculaire.