Les anticorps primaires anti-humains conjugués à l’APC-Cy7 sont des immunoréactifs à colorant tandem conçus pour la cytométrie en flux multiparamétrique. Produits après immunisation d’hôtes tels que la souris ou la chèvre avec des antigènes humains, ces anticorps sont purifiés par affinité puis conjugués à l’APC-Cy7, un fluorophore tandem composé d’allophycocyanine (APC) liée de manière covalente au colorant cyanine Cy7. Ce complexe repose sur le transfert d’énergie par résonance de fluorescence (FRET) : l’APC, excitée par un laser rouge à 633 nm, transfère son énergie au Cy7, qui émet dans le proche infrarouge à une longueur d’onde d’environ 780 nm. Cette émission dans le rouge lointain facilite la conception de panels multicolores en limitant le chevauchement spectral avec le FITC, la PE, la PerCP et l’APC. Les spécificités disponibles comprennent notamment des marqueurs CD tels que CD3, CD4, CD8, CD19, CD20, CD45 et CD185 (CXCR5). L’émission dans le proche infrarouge peut également réduire la contribution de l’autofluorescence de fond dans les échantillons de tissus humains.
Applications
Les conjugués APC-Cy7 sont principalement utilisés en cytométrie en flux et pour le tri cellulaire activé par fluorescence (FACS), notamment pour l’immunophénotypage des sous-populations de leucocytes humains dans les domaines de l’immunologie, de l’hématologie et de la recherche vaccinale. L’excitation par un laser rouge à 633 nm permet une détection simultanée avec des fluorophores excités par des lasers bleu (488 nm) et violet (405 nm), ce qui permet la conception de panels multicolores comportant environ 10 à 18 paramètres.
Cependant, l’APC-Cy7 est susceptible de subir une dégradation dépendante du temps et du type cellulaire, également appelée découplage, au niveau des leucocytes. Ce processus peut entraîner la détection d’un signal non spécifique dans le canal APC. Il a été rapporté que cet effet pouvait être réduit dans des conditions impliquant une inhibition métabolique ou une supplémentation en vitamine C. Pour assurer une stabilité optimale du réactif, les conjugués APC-Cy7 doivent être conservés à 4 °C et protégés de la lumière. Ne pas congeler. Ces produits sont destinés exclusivement à la recherche.
