La phosphoglucomutase (PGM) est une enzyme cruciale du métabolisme des glucides, catalysant la conversion réversible du glucose-1-phosphate (G1P) en glucose-6-phosphate (G6P). Cette étape est essentielle à la synthèse et à la dégradation du glycogène, ainsi qu’à la liaison entre la glycolyse et la voie des pentoses phosphates. Des kits de dosage sensibles et fiables de l'activité PGM sont essentiels pour les recherches sur la régulation métabolique, les mécanismes pathologiques et l’adaptation cellulaire au stress nutritionnel.

Rôle biologique de la phosphoglucomutase

La PGM catalyse la réaction réversible suivante :

Glucose-1-phosphate ↔ Glucose-6-phosphate

Le G1P, produit lors de la dégradation du glycogène, est converti en G6P pour alimenter la glycolyse ou la voie des pentoses phosphates, soutenant la production d’ATP et la biosynthèse. Inversement, en cas d’excès d’énergie, le G6P est reconverti en G1P pour la synthèse du glycogène. Une déficience en PGM perturbe ces voies, entraînant des maladies de stockage du glycogène et une adaptation cellulaire altérée aux variations de la glycémie.

Principe du test et méthodologie

Les kits modernes de dosage de l'activité PGM utilisent des méthodes de détection colorimétriques ou fluorométriques :

• Tests fluorométriques : Ces kits mesurent l’activité de la PGM via la conversion du G1P en G6P, lequel est ensuite oxydé par la glucose-6-phosphate déshydrogénase (G6PDH) pour produire du NADPH. Le NADPH réduit une sonde générant un signal fluorescent, permettant la détection de faibles niveaux d’activité PGM dans des lysats cellulaires ou tissulaires.
• Tests colorimétriques : Dans ce format, le NADH produit dans la réaction couplée réduit une sonde incolore en un produit coloré avec une forte absorbance. Cette méthode est simple, rapide et sensible.

Les deux approches sont compatibles avec une grande variété d’échantillons, notamment le plasma, les lysats cellulaires et les extraits tissulaires, et conviennent au criblage à haut débit.

Applications en recherche et diagnostic

• Recherche métabolique : Les dosages de PGM sont essentiels pour étudier le métabolisme du glycogène, la glycolyse et les réponses cellulaires au stress nutritionnel.
• Étude des maladies : La déficience en PGM est liée à des maladies de stockage du glycogène, et une activité PGM altérée est associée à une croissance cellulaire anormale et à une adaptation métabolique déficiente.
• Criblage de médicaments : Ces dosages permettent l’identification de modulateurs du métabolisme glucidique, avec des implications pour les recherches sur les maladies métaboliques et le cancer.

Les kits de dosage de l’activité de la phosphoglucomutase constituent un outil robuste, sensible et polyvalent pour étudier un point clé du métabolisme intermédiaire. Ils permettent une quantification précise de l’activité PGM, soutenant les études sur la régulation métabolique, les mécanismes pathologiques et la découverte thérapeutique.