Le dATP (2'-désoxyadénosine 5'-triphosphate) est un désoxyribonucléotide purique et l'un des quatre constituants fondamentaux nécessaires à la synthèse de l'ADN. Il est composé de la base azotée adénine liée à un sucre désoxyribose et à une chaîne de trois groupements phosphate en position 5'. Lors de la réplication de l'ADN, le dATP est incorporé dans les brins d'ADN en cours de synthèse par les ADN polymérases, où il s'apparie spécifiquement avec la thymidine (dTTP) selon les règles de complémentarité des bases. Métabolite cellulaire essentiel, le dATP est conservé chez un large éventail d'organismes, des bactéries aux mammifères.

Fonctions biologiques et régulation

Le dATP constitue le principal donneur de nucléotide adénine lors des processus de réplication et de réparation de l'ADN. Il est synthétisé dans la cellule à partir de l'adénosine diphosphate (ADP) par des voies enzymatiques étroitement régulées, assurant le maintien d'un équilibre des pools intracellulaires de désoxyribonucléotides. En biologie moléculaire, le dATP est un composant indispensable des réactions de PCR, du séquençage de l'ADN, du clonage moléculaire et de nombreuses techniques d'amplification enzymatique des acides nucléiques. Une pureté élevée du réactif est essentielle, car des contaminants tels que des nucléotides modifiés ou le pyrophosphate peuvent inhiber les ADN polymérases et compromettre l'efficacité de l'amplification, en particulier lors des applications de PCR en temps réel et de PCR longue distance. Les réactions de PCR standards utilisent généralement une concentration finale d'environ 0,2 mM pour chaque désoxyribonucléotide.

Applications en recherche et avantages

• Synthèse de l'ADN : Fournit le nucléotide adénine indispensable à la réplication, à la réparation de l'ADN et aux réactions d'amplification enzymatique.
• Applications en biologie moléculaire : Largement utilisé pour la PCR, la PCR quantitative (qPCR), le séquençage de l'ADN, le clonage moléculaire et d'autres techniques d'amplification des acides nucléiques nécessitant des nucléotides de haute pureté.
• Marquage avec des nucléotides modifiés : Des dérivés fonctionnalisés, tels que le Biotine-11-dATP, permettent le marquage non radioactif des sondes d'ADN pour des applications telles que l'hybridation in situ en fluorescence (FISH), le Southern blot et les systèmes de détection basés sur la streptavidine.
• Formulations de haute qualité : Disponibles sous forme de solutions hautement purifiées (≥ 99 %) à des concentrations de 10 mM et 100 mM, garantissant des performances reproductibles et une excellente stabilité lors d'une conservation à −20 °C.