Les essais d’histone acétyltransférase (HAT) sont des méthodes analytiques utilisées pour mesurer l’activité enzymatique des histone acétyltransférases, des enzymes qui transfèrent des groupes acétyle de l’acétyl-coenzyme A (acétyl-CoA) vers les résidus lysine des protéines histones. Ces essais sont largement utilisés en épigénétique, en biologie de la chromatine et en découverte de médicaments, car l’activité HAT est étroitement associée à la régulation de l’expression génique et à l’accessibilité de la chromatine. Ils constituent également des outils précieux pour le criblage de composés capables d’inhiber ou de moduler la fonction des HAT.

Principe de l’essai

Le principe fondamental d’un essai HAT repose sur la détection du transfert du groupe acétyle depuis l’acétyl-CoA vers un substrat histonique ou un peptide dérivé d’histone. Selon le format de l’essai, le produit de réaction peut être quantifié à l’aide d’un marquage radio-isotopique, d’une détection basée sur la fluorescence ou d’une lecture colorimétrique. Ces approches sont adaptées aussi bien aux études mécanistiques en enzymologie qu’aux applications de criblage à haut débit pour l’identification d’inhibiteurs.

Formats d’essais courants

Les essais HAT sont disponibles sous plusieurs formats, notamment radiométriques, fluorescents et colorimétriques.

• Essais radiométriques : Souvent considérés comme une méthode de référence, ils mesurent directement le transfert d’acétyle à l’aide d’acétyl-CoA marqué, offrant une haute sensibilité et une excellente spécificité.
• Essais fluorescents : Ces essais permettent une détection rapide et sensible sans utilisation de matériaux radioactifs et sont compatibles avec les workflows automatisés en laboratoire.
• Essais colorimétriques : Fréquemment utilisés dans les applications de routine grâce à leur simplicité et à leur compatibilité avec les formats de plaques 96 puits pour le criblage efficace de composés.