ADN polymérases rapides hotstart
L'ADN polymérase hot-start est une forme modifiée de l'ADN polymérase qui évite une amplification non-spécifique par l'inactivation de la taq polymérase à faible température. La PCR est une technologie de biologie moléculaire utilisée pour amplifier une séquence d'ADN en générant plusieurs millions de copies de cette séquence. Lors de la PCR hot-start, des anticorps spécifiques sont utilisés pour bloquer la Taq polymérase à faible température. Une étape initiale à 95°C est nécessaire pour dénaturer les anticorps liés à site actif de l'enzyme. les anticorps anti-Taq polymérase réduisent son activité en dessous de 72°C, la température optimale à laquelle l'enzyme prolonge les amorces. Quand les anticorps spécifiques se détachent de la Taq polymérase, celle-ci redevient active et peut procéder à l'amplification de la séquence cible.
La réduction du temps de la réaction de PCR permet à la fois un gain de temps et la possibilité de traiter plus d’échantillons. Lorsqu’on utilise une ADN polymérase classique pour la PCR rapide (également appelée Fast PCR), cela entraine souvent une réduction de la sensibilité et une augmentation des erreurs dans l’amplification de la séquence. C’est pourquoi il est important d’utiliser une ADN polymérase optimisée pour la PCR rapide afin de maintenir la qualité de la séquence tout en diminuant le temps nécessaire à son amplification.
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