Les anticorps primaires anti-bovin biotinylés sont largement utilisés pour des détections sensibles reposant sur des stratégies d’amplification du signal. Ces anticorps sont conjugués à de petites molécules de biotine, permettant des interactions fortes et spécifiques avec des systèmes de détection basés sur la streptavidine, ce qui améliore significativement la sensibilité analytique dans de nombreux immunodosages.
Principe de détection
La biotine est conjuguée de manière covalente aux résidus lysine de la structure de l’anticorps sans altérer sa capacité de reconnaissance de l’antigène. La streptavidine ou l’avidine se lie à la biotine avec une affinité exceptionnellement élevée, formant un complexe très stable. Lorsqu’elle est conjuguée à des enzymes ou à des fluorophores, la streptavidine permet une amplification du signal, améliorant ainsi les limites de détection.
Caractéristiques des anticorps
- Contiennent généralement 3 à 8 molécules de biotine par IgG tout en conservant une capacité complète de liaison à l’antigène.
- Optimisés pour préserver l’intégrité structurale et la compatibilité avec les tests.
- Adsorbés croisés afin de minimiser les interactions non spécifiques et le bruit de fond.
Applications principales
- ELISA : permet une détection à des niveaux de l’ordre du pg/mL des protéines sériques bovines.
- Western blot : facilite la détection de protéines faiblement exprimées.
- Immunohistochimie : permet une localisation précise des antigènes dans les coupes tissulaires.
- Cytométrie en flux : autorise des analyses cellulaires multiplexées à haute sensibilité.