Les anticorps primaires anti-humains sans azoture sont des immunoréactifs formulés sans azoture de sodium comme conservateur, spécifiquement conçus pour les applications dans lesquelles cet agent bactériostatique peut interférer avec l’activité biologique ou les étapes ultérieures du traitement. Produits après immunisation d’hôtes tels que la chèvre, le lapin, la souris ou le rat avec des immunoglobulines humaines purifiées ou des protéines humaines spécifiques, ces anticorps sont purifiés par affinité et fournis dans une solution saline tamponnée au phosphate (PBS) sans azoture, BSA ni glycérol. L’azoture de sodium est couramment incorporé aux tampons de conservation des anticorps, mais il inhibe l’activité de la peroxydase de raifort (HRP), même à faible concentration, interfère avec les réactions de conjugaison faisant intervenir des amines, telles que la biotinylation, le marquage par des fluorophores et la conjugaison à des nanoparticules, et présente une cytotoxicité pour les cellules vivantes en culture. La formulation sans azoture préserve la compatibilité avec les essais sur cellules vivantes, les procédures de marquage des anticorps et les systèmes de détection enzymatique, tout en réduisant la teneur en endotoxines pour les applications biologiques sensibles. Les spécificités disponibles comprennent notamment les anticorps anti-IgG humaine (H+L), anti-IgG humaine (Fc), les réactifs spécifiques des isotypes (IgG1–IgG4, IgA, IgM, IgE, IgD), ainsi que des anticorps dirigés contre les marqueurs CD humains, les cytokines et les protéines de signalisation. Les produits sont généralement fournis sous forme de formulations liquides ou sous forme de poudres lyophilisées à reconstituer.

Applications

Les anticorps anti-humains sans azoture sont utilisés dans diverses méthodes d’immunoanalyse nécessitant des conditions exemptes d’azoture. En cytométrie en flux sur cellules vivantes et en tri cellulaire activé par fluorescence (FACS), l’absence d’azoture évite les effets cytotoxiques et permet l’analyse fonctionnelle des cellules immunitaires humaines, notamment des lymphocytes T, des lymphocytes B et des cellules NK, sans compromettre leur viabilité. Ces anticorps sont compatibles avec une conjugaison directe pour un marquage personnalisé avec des fluorophores, des enzymes ou des nanoparticules, sans nécessiter d’échange de tampon visant à éliminer les conservateurs susceptibles d’interférer. Dans les applications de culture cellulaire, les anticorps sans azoture permettent la réalisation d’essais de neutralisation, de blocage ou de stimulation dans lesquels l’azoture pourrait altérer les fonctions cellulaires. Les autres applications comprennent la microscopie en immunofluorescence, l’immunohistochimie, les tests ELISA, le Western blot, l’immunoprécipitation et l’immunoprécipitation de la chromatine (ChIP). Les dilutions optimales des anticorps dépendent de l’application et doivent être déterminées expérimentalement. Ces réactifs sont destinés exclusivement à la recherche et ne sont pas destinés aux procédures diagnostiques.