Les anticorps primaires anti-poulet conjugués au TRITC sont des anticorps purifiés par affinité dirigés contre les immunoglobulines de poulet (Gallus gallus) ou contre des protéines spécifiques du poulet, et marqués de manière covalente avec l’isothiocyanate de tétraméthylrhodamine (TRITC). Ces réactifs à marquage direct permettent une détection fluorescente en une seule étape dans les applications de microscopie et de cytométrie en flux nécessitant un canal d’émission rouge-orangé. Le TRITC offre une bonne intensité de fluorescence et constitue une alternative économique aux fluorophores rouges plus récents lorsque la photostabilité extrême n’est pas indispensable.
Caractéristiques principales
- Marquage fluorescent direct : Les anticorps primaires sont directement conjugués au TRITC, permettant un marquage simplifié en une seule étape.
- Purification par affinité : Des formats monoclonaux et polyclonaux sont disponibles afin de minimiser les liaisons non spécifiques.
- Ratio D/P optimisé : Le rapport colorant/protéine (D/P) est soigneusement contrôlé afin d’équilibrer l’intensité de fluorescence tout en préservant l’activité de liaison à l’antigène.
- Formats flexibles : Disponibles sous forme liquide (prête à l’emploi ou concentrée) ou lyophilisée. Des formulations sans azoture peuvent être fournies sur demande pour les applications sur cellules vivantes.
- Formulations stabilisées : Les tampons contiennent généralement des stabilisants protéiques tels que la BSA ainsi que des conservateurs, notamment l’azoture de sodium lorsque cela est indiqué.
- Contrôle qualité des lots : Chaque lot est testé pour le ratio D/P, la pureté évaluée par SDS-PAGE et la validation dans des applications spécifiques telles que l’immunofluorescence (IF) et la cytométrie en flux (FACS).
Applications courantes
- Immunofluorescence (IF) et immunocytochimie (ICC) : Visualisation directe des antigènes cibles dans des cellules fixées et des coupes tissulaires à l’aide de jeux de filtres TRITC standards.
- Microscopie à fluorescence confocale et à champ large : Adapté aux études de colocalisation lorsqu’il est associé à des fluorophores spectralement distincts tels que le FITC, l’Alexa Fluor™ 488 ou le DAPI.
- Cytométrie en flux (FACS) : Compatible avec les panels monochromes et multicolores utilisant un canal de fluorescence rouge-orangé et nécessitant une luminosité modérée.
- Essais fluorescents sur plaque : Compatible avec les lecteurs de microplaques configurés pour les paramètres d’excitation et d’émission du TRITC.
- Marquage de surface sur cellules vivantes : Applicable dans certains cas lorsque des anticorps validés et des formulations sans azoture sont utilisés. Une optimisation et une validation sont recommandées pour chaque type cellulaire.
