Le principe des kits de détection ABC repose sur l'affinité de l'avidine (ou streptavidine) pour la biotine. En effet, l'abréviation ABC signifie Avidin / Biotin Complex (complexe avidine/biotine).
L'avidine est une glycoprotéine basique de 68 kDa présente dans le blanc d'œuf ainsi que dans les tissus des oiseaux, des reptiles et des amphibiens. L'avidine a une forte affinité pour la biotine, une vitamine soluble de 34 kDa. La biotine peut être couplée à une grande variété de molécules biologiques telles que les anticorps, et plusieurs molécules de biotine peuvent être liées à une protéine. La protéine biotinylée peut alors se lier à plusieurs molécules d'avidine. L'un des inconvénients de l'avidine est sa liaison non spécifique à des structures chargées négativement telles que le noyau des cellules. L'utilisation de la streptavidine réduit considérablement cette liaison non spécifique.
La streptavidine est isolée à partir de Streptomyces avidinii et est similaire en taille et en affinité à l'avidine-biotine. Mais contrairement à l'avidine, la streptavidine n'est pas glycosylée, ce qui rend les protéines moins sujettes à la liaison non spécifique dans les applications immunohistochimiques.
Les kits de détection ABC anti-chèvre sont conçus pour la détection des IgG de chèvre :
- Anticorps secondaires biotinylés anti-IgG de chèvre
- Complexe avidine/enzyme (HRP ou AP)
Principales caractéristiques des kits de détection Anti-Goat IgG ABC
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Ils contiennent un anticorps secondaire IgG anti-chèvre biotinylé de lapin.
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Utilisent un complexe avidine-biotine conjugué à des enzymes telles que la peroxydase de raifort (HRP).
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Conviennent à des applications telles que l'immunohistochimie (IHC), l'immunocytochimie (ICC), le transfert, l'ELISA et l'Elispot.
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Offre une bonne sensibilité et un faible signal de fond.
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Les substrats enzymatiques couramment utilisés avec la HRP dans ces kits sont le DAB (produisant un précipité brun) ou l'AEC (précipité rouge).
Les kits peuvent contenir ou non les tampons de blocage et de dilution ainsi que le substrat, selon les formats.
