Les octamères d’histones recombinants sont des particules nucléosomiques de cœur définies, assemblées in vitro à partir de protéines histones recombinantes purifiées (H2A, H2B, H3 et H4). Ces octamères constituent des éléments de base standardisés pour la reconstitution de la chromatine sur des séquences d’ADN définies, permettant la réalisation d’études biochimiques, biophysiques et structurales sur la dynamique des nucléosomes, les interactions histone-ADN, les complexes de remodelage de la chromatine et les enzymes impliquées dans les modifications des histones.

Principaux avantages

• Composition définie : Produits à partir d’histones entièrement recombinantes dont les séquences et les états de modification sont parfaitement caractérisés (non modifiés ou modifiés de manière spécifique sur certains sites), éliminant la variabilité associée aux préparations de chromatine native.
• Pureté et reproductibilité élevées : Des procédés contrôlés d’expression et de purification garantissent des performances biochimiques reproductibles ainsi qu’une excellente homogénéité entre les lots.
• Format prêt à l’assemblage : Disponibles sous forme d’octamères préassemblés ou d’histones monomériques purifiées destinées à un assemblage personnalisé, réduisant le temps de préparation et la variabilité expérimentale.
• Grande flexibilité : Disponibles avec différentes variantes d’histones telles que H3.3, H2A.Z et macroH2A, ainsi qu’avec des mutations ponctuelles spécifiques ou des analogues mimant des modifications post-traductionnelles, notamment la méthylation de lysines et l’acétylation de lysines.
• Large compatibilité expérimentale : Adaptés à l’assemblage de nucléosomes par gradient salin ou dialyse saline, aux études de positionnement nucléosomal, à la microscopie électronique cryogénique (cryo-EM), à la diffusion des rayons X aux petits angles (SAXS), aux essais EMSA, aux analyses de remodelage de la chromatine ainsi qu’aux approches à molécule unique.

Applications

• Reconstitution de nucléosomes in vitro : Génération de matrices chromatiniennes définies pour l’étude des complexes de remodelage de la chromatine, des facteurs de transcription et des enzymes modifiant les histones.
• Biologie structurale : Analyse de l’architecture des nucléosomes et des complexes chromatinien à l’aide de la microscopie électronique cryogénique (cryo-EM), de la cristallographie aux rayons X et de la diffusion des rayons X aux petits angles (SAXS).
• Études biophysiques : Évaluation de la stabilité des nucléosomes, de l’accessibilité de l’ADN et de la dynamique de la chromatine au moyen de techniques telles que le FRET à molécule unique, les pinces optiques et d’autres approches apparentées.
• Standards et contrôles expérimentaux : Utilisation comme substrats chromatinien définis pour les essais enzymatiques, la validation d’anticorps et l’étalonnage des protocoles basés sur la MNase, l’ATAC-seq et le CUT&Tag.